一、鸡传染性法氏囊病检测试剂盒
二、通用名称：（实时荧光PCR法）
三、包装规格 50T/盒
四、预期用途：
鸡传染性法氏囊病(IBD)又称甘波罗病，是由呼肠弧病毒引起的一种急性、高度传染性疾病。本试剂盒利用实时荧光PCR原理，主要用于鸡传染性法氏囊病的定性筛查检测及疗效评估有重要指导意义。
五、鸡传染性法氏囊病检测试剂盒原理：
鸡传染性法氏囊病毒检测试剂盒针对鸡传染性法氏囊病基因组高度保守区域设计特异性引物和探针，在反应体系中含鸡传染性法氏囊病基因组模板的情况下，PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出，实现检测结果的定性分析。
六、鸡传染性法氏囊病检测试剂盒组成：
RT-PCR反应液、混合酶液、阳性对照、阴性对照。
七、储存及有效期：
避光-20℃以下保存，避免反复冻融，有效期为12个月。
八、适用仪器：ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列 、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。
九、注意事项：
1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
七、样品DNA的制备
用自选方法提取Cps DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PGR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
制备Cps标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DN段作为阳性对照。
1、标记6个离心管，分别为6,5,4,3,2和1号。
2、用带芯枪头分别加入45μL超纯水(最好用带芯枪头，下同)
3、先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注：请不要将本试剂盒提供的标准品次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍，梯度稀释至0E7拷贝/μL)
4、在6号管中加入5μL10E7拷贝/uL的Cps阳性对照（上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照.
