环丙沙星检测试剂盒样本前处理具体操作步骤

5 样本前处理

5.1 样本处理前须知：

实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：

配液1：0.15M盐酸溶液

    取5ml浓盐酸，加入去离子水中定容到400ml。

配液2：样本提取液

    量取10ml 0.15M盐酸溶液（配液1）加入到90ml无水乙腈中混合均匀。

配液3：复溶液

    将5×复溶液用去离子水5倍稀释，用于样本的复溶，复溶液在4℃环境可保存一个月。

5.3 样本前处理步骤：

5.3.1 动物组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）处理方法

1）称2.0±0.05g 均质过的组织样本于50ml离心管中；

2）加入8ml样本提取液（配液2），振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟；

3）取2ml清澈上层有机相至洁净干燥的10ml玻璃试管中，50-60℃水浴氮气吹干；

4）加入1ml正己烷，振荡2分钟，再加1ml复溶液（配液3），振荡30秒，室温4000转/分离心5分钟；

5）去除上层正己烷，取下层水相50µl液体用于分析。

样本稀释倍数：2    检测下限：0.3ppb

5.3.2 蜂蜜处理方法

1）取1.0±0.05g蜂蜜至50ml聚苯乙烯离心管中，加6ml样本提取液（配液2），振荡5分钟，使其充分溶解；

2）加入3ml复溶液（配液3），加入11ml二氯甲烷，振荡5分钟，室温4000转/分，离心5分钟；

3）吸去上层，取下层有机相8ml至干燥溶器中，50-60℃水浴氮气吹干；

4）用1ml复溶液溶解干燥的残留物，再加入正己烷1ml混合30秒，室温3000转/分以上，离心5分钟；

5）去除上层取下层50µl液体用于分析。

样本稀释倍数：2    检测下限：0.4ppb

5.3.3 牛奶处理方法：

1）取25µl样本液与475µl复溶液（配液3）混合，振荡1分钟，使其充分溶解；

2）取50µl液体用于分析。

样本稀释倍数：20    检测下限：3ppb

5.3.4 奶粉处理方法：

1）称取0.5±0.02g均质物至10ml聚苯乙烯离心管中，加入5ml去离子水，振荡，使其充分溶解；

2）取100µl样本液与400µl复溶液（配液3）混合，振荡1分钟；

3）取50µl液体用于分析。

样本稀释倍数：50    检测下限：6ppb

5.3.5 鸡蛋处理方法：

1）称取1.0±0.02g均质物至10ml聚苯乙烯离心管中，加入5ml去离子水，振荡，使其充分溶解；

2）取100µl样本液与400µl复溶液（配液3）混合，振荡1分钟；

3）取50µl液体用于分析。

样本稀释倍数：30    检测下限：3ppb