1.仔细阅读说明书严格按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方，反复试验确定成立后才能改进。

　　2.使用校对过的微量移液器，排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。

　　3.检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械，具有一定总结和分析问题的能力，对ELISA试剂盒实验中出现的意外情况能及时妥善解决。

　　4.评估试剂的实用性

　　试剂的稳定与否，对准确率的高低到头重要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品反复比照试验。

　　显色时间过短，加入终止液反应终止后，底物结合物的量过少，易ELISA试剂盒出现假阴性。超过显色要求时间后显色，应判为假阳性，这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色，不可报阳性，这可能是本底显色的结果。

　　5.严控反应时间

　　反应时间过长，酶失活；反应时间过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合，生成物结构松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假阴性。

　　6.注意ELISA试剂盒保存期，过保存期的试剂不能使用。

　　4.洗涤*

　　洗板不*，酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜，现用现配，陈旧的洗涤液会出现本底增高现象，也可能出现假阳性。

　　9.加样要准确、快速

　　如果加样不准确，酶生成物的量不能确定，直接影响显色结果。显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关，所以加样应慎重。要求在一定时间内加样完毕的实验，如果加样迟缓，便出现误差，而且ELISA试剂盒试剂长时间暴露在外，尤其室温过高时，保存期会缩短甚至失效。